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菊花種苗矮化試管繁殖研究

日期: 2019-02-05 21:51 瀏覽次數 :

菊花種苗矮化試管繁殖研究
 
以開封菊花試管苗為材料,分別設計6-BA、IBA、NAA各4個水平,通過正交試驗來研究外源激素對矮化菊花試管苗生長的影響,結果表明對矮化試管菊花苗快速繁殖影響最大的是外源生長素的含量,在只添加細胞分裂素的培養基中外植體無法分化出芽體。適合矮化菊花試管苗快繁的最佳外源激素組合為1_5 mg/L 6-BA+0.075 mg/L NAA。
 
 
菊花屬菊科菊屬,原產我國,多年生宿根草本植物。株高20-200 cm,通常為30-90 cm。莖嫩綠色或褐色,直立分枝,基部半木質化。單葉互生,卵圓至長圓形,邊緣有缺刻及鋸齒。頭狀花序頂生或腋生,1朵或數朵簇生。因其具有較髙的觀賞價值,我們從2006年起做了一系列的研究,已經獲得了菊花耐鹽的菊花試管苗和矮化試管菊花種苗。本試驗通過正交設計對菊花苗矮化試管化快繁進行研究,以期為菊花種苗矮化試管產業化提供試驗依據。
1材料與方法
1.1材料
試驗用材料為侯仁浩等[4]經過矮化獲得的試管菊花苗。將其在齊向英等篩選的MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA+0.01 mg/L TDZ中培養25 d作為試驗用材料。
1.2方法
實驗設計:以MS培養基為基本培養基、附件52 g/L瓊脂和20g/L蔗糖。6-BA、IBA、NAA為外源激素。分別設置6-BA 1.0 mg/L、1.5 mg/L、2.0和2.5 mg/L 4個水平;IBA 0 mg/L、0.25 mg/L、0.5 mg/L和0.75 mg/L 4個水平;NAA濃度0.1 mg/L、0.075 mg/L、0.05 mg/L、0 mg/L。
將矮化試管菊花苗修剪成2.0 cm含莖尖,接人繼代培養基中,在光照強度(1 700±200)lx、光照時間12 h/d、濕度65%~80%條件下培養。以培養30 d的數據來作試驗分析。每個處理隨即抽取30個外植體做統計分析。
2結果與分析
在培養后10 d,矮化試管菊花苗在繼代培養基中F5中最先分化出芽體,芽體呈簇生狀態,隨著培養時間的增加簇生的幼苗逐漸展開,形成有莖形態的無根試管菊花苗。從培養后15 d開始,除F13外的其余培養基中均陸續不斷地分化出叢生芽。直到培養結束,F13中始終沒有分化出任何芽體。F3、F4和F14的分化能力較弱,繁殖系數均沒有達到4 以上,其中F5的繁殖系數達到9.66。
6-BA對矮化試管菊花苗繼代培養的影響
隨6-BA濃度的增大,矮化試管菊花苗的繁殖系數呈現先升髙后降低的趨勢,其中在6-BA為1.0、1.5、2.0、2.5 mg/L時繁殖系數分別為4.54 5,6.972 5、6.112 5、4.577 5。在6-BA濃度為1.5 mg/L時最大,6-BA濃度為1.0 mg/L時最小,極差為2.427 5。
IBA對矮化試管菊花苗繼代培養的影響
隨IBA濃度的增大,矮化試管菊花苗的繁殖系數一直呈現降低的趨勢。在IBA濃度為0、0.25、0.5、0.75 mg/L時,矮化試管菊花苗的繁殖系數分別為6.44,5.707 5、5.655、
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3討論
花卉的組培和快繁一直是花卉生產的重點,菊花的組培快繁研究較多。梁稱福等[5]在大頭菊上組培的結果表明,在MS+1.0 mg/L BA+0.1 mg/L NAA、MS+2.0 mg/L BA+0.1 mg/L NAA、MS+3.0 mg/L BA+0.1 mg/L NAA的增殖培養基上培養2?d后芽增殖3.65-5.90倍;但其接種的個數太少,僅有20個外植體。任旭琴等[6]以千頭菊為材料發現較高濃度的6-BA能促進芽的形成,在2.0~3.0 mg/L 6-BA之間的腋芽生長速度最快,長度可以達到1.6 cm;并且發現較髙濃度的NAA會抑制芽的形成。這與本研究中IBA的結論相似。鄧年方等⑺以菊花花瓣建立無性系,在快繁中發現6-BA和NAA對促進愈傷組織誘導、叢生芽的形成具有顯著的效果,誘導愈傷組織和叢生芽的最佳培養基是MS+1.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,以IBA作為外源激素的誘導能力低于用NAA。張紅以綠牡丹的幼嫩枝建立無性系后發現叢生芽增殖培養的最佳培養基為MSi+0.2 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA。劉忠榮w對菊花的組培快繁做了綜述,認為菊花繼代快繁可以用初代培養中較好的培養基。王康才等[1°]對杭菊花(大白菊、小白菊、黃菊)始花期花蕾的花瓣做組培研究的結果表明,以MS+0.2 mg/L NAA+2 mg/L KT培養基較好,培養40 d后芽分化率為72.2%~81.8%。劉鵬等[11]以陜西的九月菊為材料研究發現,IAA與6-BA的配比對菊花有促進生長的作用,而低濃度的NAA或IAA與6-BA配比使菊花的生長滯化,甚至死亡。劉興玉等〖121以菊花花瓣為外植體的研究發現MS+3.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA最適合繼代培養。本研究的結果表明矮化試管菊花苗最適繼代培養基為MS+1.5 mg/L 6-BA+0.075 mg/L NAA,與上述研究的差別可能是外植體不同引起的。
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開封市園林菊花研究所

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